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冷凍干燥機凍干保存細菌菌種操作步驟

點擊次數:2002    更新時間:2017-04-28

  冷凍干燥機用于細菌領域也常被稱為菌種冷凍干燥機、細菌凍干機、菌種凍干機等,可以用于凍干保存細菌、菌種等,其操作步驟如下:

1. 所用培養基及凍干保護劑均高壓滅菌;

2. 取分離所得細菌菌液或甘油保存的細菌一環,在培養板上分區或蛇形劃板(大腸桿菌在麥康凱平板上劃板),37℃倒置培養過夜;

3. 取一只干凈的試管,倒入約10mL培養液(大腸桿菌用LB培養液),從培養過夜的平板中挑取一個單菌落于該培養液中,37℃振蕩培養過夜;

4. 取10個干凈的西林瓶,每瓶加入1mL凍干保護劑,再加入1mL培養過夜的菌液,蓋上橡膠塞,留出氣孔,標記好之后放入-80℃冰箱使其冷凍;

5. 啟動冷凍干燥機預熱約30min,迅速將已冷凍的菌液放于冷凍干燥機上,一般十幾小時之后細菌已凍干,關閉冷凍干燥機,取出已凍干的細菌,壓蓋,放于-80℃超低溫冰箱保存,可達十年之久。

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